En la 23ª Conferencia Internacional sobre el SIDA (AIDS 2020: Virtual), un estudio piloto que utilizó un nuevo ensayo para medir los niveles de provirus intacto (probablemente capaz de replicarse) y defectuoso en el reservorio de VIH de los controladores de élite, mostró que estos los individuos tienen bajos niveles de provirus intactos. También mostró que estos bajos niveles de ADN intacto se asociaron con la presencia de alelos protectores de HLA.
Tales resultados son importantes para una mejor comprensión del reservorio del VIH en los controladores de élite y, en consecuencia, el progreso científico hacia una cura del VIH.
Antecedentes
El reservorio de VIH latente es un grupo de células que están infectadas con VIH pero que no producen virus nuevos durante muchos meses, si no años. Se establece durante la etapa más temprana de la infección por VIH y persiste a pesar de la terapia antirretroviral. En los controladores de élite del VIH, que son un subconjunto de personas que viven con el VIH y controlan la replicación del VIH sin tomar terapia antirretroviral durante un período de tiempo inusualmente largo, el tamaño del reservorio es limitado.
Sin embargo, existen diferencias entre los controladores de élite en términos del grado y la durabilidad del control del VIH. La identificación de las características del reservorio en individuos con control excepcional puede informar estrategias actualmente en desarrollo para curar el VIH, particularmente estrategias que apuntan al reservorio latente y reducir la cantidad de provirus lo suficientemente competentes como para replicarse.
Los provirus intactos no producen partículas virales cuando están inactivos. Sin embargo, mantienen su capacidad de generar nuevos viriones infecciosos en respuesta a su activación y, por lo tanto, son responsables de los rebotes virales que siguen a las interrupciones del tratamiento.
Los provirus defectuosos también pueden denominarse «incompletos». Para algunos científicos, son capaces de liberar proteínas virales pero no viriones infecciosos. Para algunos otros, representan colectivamente un «cementerio» de virus incompetentes, lo que sugiere que es posible que no sea necesario eliminarlos en las estrategias de cura del VIH.
La investigación relacionada con la curación incluye la identificación de los niveles precisos de provirus de VIH intactos y defectuosos y sus correlatos biológicos en grandes cohortes de controladores de élite, como explicó el Dr. Michael Peluso de la Universidad de California en San Francisco (UCSF). Para estimar el tamaño del reservorio de ADN proviral intacto en los controladores de élite, incluidos aquellos con los niveles más altos de control, él y sus colegas utilizaron una prueba recientemente desarrollada llamada ensayo de ADN proviral intacto, o IPDA.
El IPDA tiene el potencial de desempeñarse mejor que sus predecesores en la estimación del reservorio competente para la replicación, porque puede detectar un mayor número de provirus intactos, al tiempo que distingue los intactos de los defectuosos que, como se explicó anteriormente, es poco probable que importen clínicamente . Hoy en día, hay varias descripciones del uso de IPDA en individuos que toman terapia antirretroviral supresiva, pero los datos sobre el ensayo en grandes cohortes de controladores siguen siendo limitados.
El estudio
En este estudio piloto, los investigadores «probaron la prueba» en diez millones de células mononucleares de sangre periférica, comúnmente llamadas PBMC, tomadas de 74 controladores de élite inscritos en la cohorte UCSF SCOPE. Esta cohorte es un estudio observacional de personas que viven con el VIH, diseñado para proporcionar muestras para explorar múltiples preguntas sobre el VIH-1, como la respuesta al tratamiento, el control del virus y la evolución de la resistencia a los medicamentos.
Los investigadores también evaluaron las asociaciones del reservorio medido con la presencia de alelos HLA y con el ARN del VIH asociado a las células.
El HLA (antígeno leucocitario humano) son moléculas que descansan sobre la superficie de las células para permitir que el sistema inmunitario identifique estos antígenos como propios del cuerpo. Tienen varias variantes genéticas diferentes, llamadas alelos, que permiten el ajuste fino del sistema inmune adaptativo. Con el tiempo, la investigación ha demostrado que algunos controladores de VIH están protegidos de los efectos del virus por algunos alelos HLA: HLA B * 27, B * 57 y B * 58.
En este contexto, el ARN asociado a las células se refiere al ARN del VIH transcrito a partir de provirus que se integran a la célula, para servir como «moldes» para la síntesis de proteínas virales (la codificación de proteínas virales). Por lo tanto, la medida del ARN asociado a células puede usarse como un marcador confiable de la replicación persistente de bajo nivel de VIH.
Se hicieron algunas comparaciones entre esta cohorte de controladores de élite y no controladores que toman terapia antirretroviral supresora, que también se sometieron a pruebas con IPDA.
Resultados
Muchos de los participantes no tenían provirus intactos, a pesar de tener no intactos. De los 74 controladores, 41 (55.4%) tenían niveles indetectables de provirus intactos, mientras que una proporción mucho menor de ellos tenía niveles indetectables de provirus defectuosos. Es probable que este resultado se deba a la baja carga viral general en estos participantes, así como al número limitado de células examinadas.
Los controladores de élite tenían muchas más probabilidades de tener medidas indetectables que los no controladores.
Cuando se podían medir en los controladores, los niveles de ADN proviral intactos tenían un amplio rango dinámico, de 10.5 a 3430 copias por millón de PBMC. En general, fueron más bajos que los niveles de provirus no intactos.
Cuando se compararon los controladores con los no controladores que toman terapia antirretroviral supresiva, los niveles promedio de provirus intactos fueron más bajos en los controladores. Sin embargo, este efecto fue impulsado por la cantidad de controladores de élite con provirus intactos indetectables. Entre los controladores que tenían ADN intacto detectable, el rango de estimaciones fue similar al rango observado en los no controladores en terapia antirretroviral supresiva.
Con respecto a la presencia de alelos HLA, los investigadores encontraron que tendían a agruparse en aquellos participantes con provirus intactos indetectables, lo que sugiere que tales individuos pueden tener respuestas inmunes más potentes de sus células CD8. También se encontró una correlación entre el ADN intacto y no intacto con el ARN del VIH asociado a las células.
Peluso resumió los resultados clave:
- Los controladores Elite tenían un bajo nivel de ADN proviral intacto, en comparación con el ADN no intacto.
- Los niveles bajos de ADN intacto se asociaron con la presencia de alelos protectores de HLA.
También señaló que el estudio había estado limitado por la cantidad de ADN de entrada disponible para el análisis, debido a la interrupción de la pandemia de COVID-19. Él y sus colegas ahora reanudaban sus experimentos con un mayor número de células, que son necesarias para determinar si el tamaño del reservorio de VIH intacto tiene correlaciones clínicamente significativas en los controladores de VIH.
«El objetivo de estos esfuerzos es determinar si el IPDA puede ser útil para estratificar los controladores naturales, entre grupos de reservorios intactos altos y bajos, para futuras investigaciones», dijo. Referencias
Peluso MJ y col. Los bajos niveles de ADN proviral intacto en los controladores de élite del VIH se asocian con el ARN del VIH asociado con las células y los alelos protectores de HLA. 23a Conferencia Internacional sobre el SIDA, resumen OAA0102, 2020